手性柱的類型都有哪些?手性色譜柱(Chiral HPLC Columns)是由具有光學(xué)活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相(Chiral Stationary Phases)。
第1類:通過氫鍵、π-π作用、偶極-偶極作用形成復(fù)合物。
第2類:既有類型1中的相互作用,又存在包埋復(fù)合物。此類手性色譜柱中典型的是由纖維素及其衍生物制成的手性色譜柱。
第3類:基于溶劑進(jìn)入手性空穴形成包埋復(fù)合物。這類手性色譜柱中最典型的是由Armstrong教授開發(fā)的環(huán)糊精型手性柱[2],另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物,如聚(苯基甲基甲基丙烯酸酯)形成的手性色譜柱也屬于此類。
第4類:基于形成非對(duì)映體的金屬絡(luò)合物,是由Davankov開發(fā)的手性分離技術(shù),也稱為手性配位交換色譜(CLEC)。
第5類:蛋白質(zhì)型手性色譜柱。手性分離是基于疏水相互作用和極性相互作用實(shí)現(xiàn)。
A、配位交換型:
手性配位交換色譜(ChiralLigandExchangeChromatography,CLEC)由Davankov發(fā)明,是通過形成光學(xué)活性的金屬絡(luò)合物而達(dá)到手性分離,屬于IrvingWainer分類中的第4類手性固定相,主要用于分離氨基酸類。
由于此類固定相是由手性氨基酸—銅離子絡(luò)合物鍵合到硅膠或聚合物上形成,因此流動(dòng)相中必須含有銅離子以保證手性固定相上的銅離子不至流失。其它的過渡金屬元素也已用于手性配位交換色譜,但銅離子應(yīng)用最廣。形成絡(luò)合物的過程十分緩慢,因此有時(shí)需提高柱溫,最佳溫度約50℃。
手性配位交換色譜僅對(duì)α-氨基酸和其類似物有效。β-氨基酸很難用手性配位交換色譜得以分離。手性配位交換色譜可用于制備,由于流動(dòng)相中存在銅離子,雖然銅離子能用離子交換柱除去,但增加了樣品處理的困難。
B、大環(huán)抗生素型:
大環(huán)抗生素型手性色譜柱是最近發(fā)展起來的,通過將大環(huán)抗生素鍵合到硅膠上制成的新型手性色譜柱。大環(huán)抗生素型手性色譜柱的出現(xiàn)歸功于DanArmstrong的貢獻(xiàn)。此類色譜柱常用的大環(huán)抗生素主要由三種:利福霉素(Rifamycin),萬古霉素(Vancomycin),替考拉寧(Ticoplanin)。利福霉素作為手性添加劑在毛細(xì)管電泳分離手性化合物方面得到了成功運(yùn)用。萬古霉素和替考拉寧分子結(jié)構(gòu)中存在“杯”狀結(jié)構(gòu)區(qū)和糖“平面”結(jié)構(gòu)區(qū)。此類色譜柱性質(zhì)穩(wěn)定,可用于多種分離模式。手性分離基于氫鍵、π-π作用、形成包合物、離子作用和肽鍵等。
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