C18反相液相色譜柱的維護及操作步驟

C18反相液相色譜柱的保養(yǎng)與維護

1.C18反相液相色譜柱的平衡過程

c18反相液相色譜柱在測試后應儲存在乙腈和水的混合溶液中。新柱使用前需用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈進行沖洗。務必確保分析樣品所用的流動相與乙腈/水能夠互溶。每天要花足夠的時間用流動相來平衡c18反相液相色譜柱。

C18反相液相色譜柱的操作步驟如下：

a.在平衡開始時，逐漸提高流速，用流動相對色譜柱進行平衡，直到得到穩(wěn)定的基線（如果緩沖鹽或離子對試劑的流速較低，平衡所需的時間可能會更長）。

b.如果流動相中含有緩沖鹽，則需要注意用純水進行過渡。在每天的分析開始之前，必須先用純水沖洗30分鐘以上，然后再用含緩沖鹽的流動相進行平衡；分析結束后，也必須先用純水沖洗30分鐘以上，以去除緩沖鹽，然后再用甲醇沖洗30分鐘，以保護柱子。

2．C18反相液相色譜柱的恢復

長期使用的C18反相液相色譜柱，通常會導致柱效下降（理論塔板數(shù)減少）。可以對C18反相液相色譜柱進行再生，建議在具備條件的實驗室中，使用一臺經(jīng)濟實惠的泵進行柱子的再生處理。

具體再生步驟如下：首先，用高濃度的有機溶劑（如純甲醇或乙腈）以較低流速沖洗柱子數(shù)小時，以去除可能積累的雜質和污染物。隨后，改用一種溫和的酸性或堿性溶液（如0.1M的磷酸或氫氧化鈉溶液，需根據(jù)柱子耐受性選擇），同樣以低流速沖洗數(shù)小時，這一步旨在中和并去除可能吸附在柱子表面的殘留物。完成酸堿處理后，務必再次用高濃度有機溶劑沖洗，徹底洗凈酸堿殘留，恢復柱子至中性環(huán)境。

此外，定期進行反向沖洗也是保持柱子性能的有效手段，但需注意不是所有柱子都支持此操作，操作前務必查閱柱子說明書。反向沖洗時，使用與常規(guī)方向相反的流動相，以輕微松動并去除柱內可能堵塞的顆粒。

最后，每次使用完畢后，除了上述的沖洗步驟，還應確保色譜柱內充滿適宜的保存溶劑，并存放在陰涼干燥處，避免溫度和濕度的劇烈變化，這些都能有效延長C18反相液相色譜柱的使用壽命，確保其持續(xù)提供高質量的分離效果。