流動(dòng)相使用前一定要脫氣嗎？

欄目：行業(yè)資訊發(fā)布時(shí)間：2024-08-01

流動(dòng)相是影響液相色譜?的關(guān)鍵因素。一個(gè)理想的液相色譜流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測(cè)器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。

流動(dòng)相是影響液相色譜的關(guān)鍵因素。一個(gè)理想的液相色譜流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測(cè)器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。

問(wèn)

流動(dòng)相使用前為什么要脫氣？

首先我們了解一下不脫氣可能造成的影響：

氣泡會(huì)增加基線的噪音，造成靈敏度下降，甚至無(wú)法分析（噪聲增大，基線不穩(wěn)，突然跳動(dòng)）。

溶解的氧氣還會(huì)導(dǎo)致樣品中某些組份被氧化，柱中固定相（如烷基胺）發(fā)生反應(yīng)，降解而改變柱的分離性能。

溶解氧能與某些溶劑（如甲醇、四氫呋喃）形成有紫外吸收的絡(luò)合物，此絡(luò)合物會(huì)提高背景吸收（特別是在260nm以下），并導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度的輕微降低，會(huì)在梯度洗脫時(shí)造成基線漂移或形成鬼峰（假峰）。

若用FLD（熒光檢測(cè)器），溶解氧在一定條件下還會(huì)引起淬滅現(xiàn)象，特別是對(duì)芳香烴、脂肪醛、酮等。在某些情況下，熒光響應(yīng)可降低達(dá)95%。

脫氣的作用

除去其中溶解的氣體（如O_₂），以防止在洗脫過(guò)程中當(dāng)流動(dòng)相由色譜柱流至檢測(cè)器時(shí)，因壓力降低而產(chǎn)生氣泡。

排出氣泡能減少泵工作的傷害，提高UV檢測(cè)器的性能，改善靈敏度。

脫氣的方式

氦氣脫氣法：在色譜操作前和進(jìn)行時(shí)，將惰性氣體噴入溶劑中。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，此方法不能將溶劑脫氣，它只是用一種低溶解度的惰性氣體（通常是氦）將空氣替換出來(lái)。主要利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高。

真空脫氣：多數(shù)企業(yè)常用真空脫氣法進(jìn)行流動(dòng)相脫氣。貯液器被抽成部分真空，溶入的氣體蒸發(fā)形成氣泡溢出，其效果僅次于氦氣脫氣。

超聲脫氣法：流動(dòng)相放在超聲波容器中（一般500ml溶液需超聲20-30min），此法不影響溶劑組成。超聲時(shí)應(yīng)注意避免溶劑瓶與超聲槽底部或壁接觸，以免玻璃瓶破裂，容器內(nèi)液面不要高出水面太多。

加熱回流法：效果較好，但操作復(fù)雜，且有毒性揮發(fā)污染，同時(shí)需要考慮低沸點(diǎn)溶劑揮發(fā)造成的組成變化。

在線脫氣法：高效液相色譜儀可配在線脫氣機(jī)。在線脫氣使用簡(jiǎn)單，低故障，有效。以下兩種情況需要簡(jiǎn)單說(shuō)明：

A. 離線脫氣法如超聲脫氣，用來(lái)去除流動(dòng)相中較大的氣泡。

B. 在線脫氣法用來(lái)去除流動(dòng)相中較小的氣泡。

總結(jié)

用真空抽濾后，再用超聲脫氣還是最常用的辦法，用氦氣的方法是效果最好的辦法，而在線脫氣本身也是真空脫氣，但它可以放到儀器上使用，是一種保證性的辦法。

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