液相色譜柱能夠反沖？
這是很多用液相色譜技術(shù)人員的一個(gè)疑問(wèn)。
看到有小伙伴說(shuō)，如果色譜柱柱頭堵了，壓力升高了，反沖完的效果也不錯(cuò)。
也有小伙伴說(shuō)，廠家說(shuō)不建議反沖，沖了會(huì)影響柱效?。?！
那么，今天我們就來(lái)分析討論一下！色譜柱到底能不能反沖，以及背后的原因是什么?
當(dāng)色譜圖峰型變差或儀器壓力過(guò)高時(shí)，我們會(huì)使用不同溶劑對(duì)色譜柱進(jìn)行反向沖洗，雖然看到了一些改進(jìn)，但效果并不穩(wěn)定。我們?cè)撊绾胃倪M(jìn)呢？答：作為色譜柱生產(chǎn)廠家，小研并不提倡反向沖柱。大多數(shù)情況下，反向沖柱并不起作用，而當(dāng)我們認(rèn)為它起作用時(shí)，也可以通過(guò)更合理的方式來(lái)改善。什么情況下我們需要嘗試對(duì)色譜柱反向沖洗？原因可能有：由于流動(dòng)相或 HPLC 儀器中的樣品成分或碎屑堆積在柱頭導(dǎo)致的壓力升高、色譜柱性能顯著下降。如果碎屑足夠多，就會(huì)聚集在色譜柱過(guò)濾片的外表面，導(dǎo)致過(guò)濾片損壞，這種情況下，更換過(guò)濾片與反向沖洗的效果是一樣的。
不過(guò)，根據(jù)小研的經(jīng)驗(yàn)，過(guò)濾片損壞的問(wèn)題是比較少發(fā)生的，一般是色譜柱柱頭被污染物污染并吸附堵塞，導(dǎo)致色譜柱壓力升高。當(dāng)污染物分子量較大或溶解度較低時(shí)，會(huì)堵塞色譜柱內(nèi)填料之間的通道，而第一層填料受到污染物的作用力最大，填料層被擠壓重新排列、變形，甚至塌陷，最終導(dǎo)致峰形惡化。要修復(fù)這種填料結(jié)構(gòu)內(nèi)部的損壞是非常困難的，甚至是不可能的，反向沖洗色譜柱充其量只是一場(chǎng)賭博。反向沖洗可能不是一個(gè)很好的解決方案，但確實(shí)有幫助，至少可以讓色譜柱的壽命更長(zhǎng)一些？答：反沖色譜柱有一點(diǎn)幫助但不多，小研喜歡更可靠、更持久的解決方案——保護(hù)柱。保護(hù)柱通常是指安裝在進(jìn)樣器和分析柱之間的小短柱，通過(guò)預(yù)先捕集能被分析柱牢固吸附，不能被流動(dòng)相所洗脫的物質(zhì)，保護(hù)并延長(zhǎng)分析柱使用壽命。保護(hù)柱就像是疫情期間必備的口罩，把病毒阻擋在人體外面，流動(dòng)相和樣品里如有什么損害柱子的污染物，保護(hù)柱就自己承受，不會(huì)讓其進(jìn)入分析柱。市場(chǎng)上有許多不同的保護(hù)柱。我應(yīng)該使用哪一種？
答：保護(hù)柱很重要，但選擇合適的保護(hù)柱更重要，選擇或使用不當(dāng)也可能帶來(lái)截然相反的效果。保護(hù)柱的填料，要與分析柱保持一致！填料品牌一致，才能100%確保選擇性一致。此外，保護(hù)柱的規(guī)格，要與分析柱匹配！填料粒徑一致，保護(hù)柱的內(nèi)徑與分析柱的內(nèi)徑相近。對(duì)于精細(xì)分離，保護(hù)柱本身的裝填柱效要足夠好！保護(hù)柱建議專(zhuān)柱專(zhuān)用，避免保護(hù)柱成為不同項(xiàng)目的交叉污染源。當(dāng)峰的理論塔板數(shù)下降15%，或是柱壓上升15%，或是關(guān)鍵分離度下降15%時(shí)，都應(yīng)該及時(shí)更換保護(hù)柱。廣州研創(chuàng)推出手性及常規(guī)系列色譜柱的“保護(hù)傘”——保護(hù)柱！歡迎聯(lián)系訂購(gòu)18922204815 / 020-32051815
手性色譜柱嬌貴，需要嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)使用，反沖是不建議的！知其然、知其所以然、知其所以必然。今日小研分享的知識(shí)就先到這啦，希望能對(duì)你們有所幫助！
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